生物缓冲剂中的“扛把子”- Tris

2021/12/30

生物缓冲剂是通过中和氢离子的作用, 在一定范围内保持稳定的PH值的有机物质，一般都是用于研究实验室里，主要应用在蛋白质电泳、聚合酶链反应和蛋白质印迹的应用中。生物缓冲剂还是建模生物系统的重要组成部分，在细胞培养、分子生物学、核酸和蛋白质纯化等领域内有着许多用途。

生物缓冲剂有着许多品种，常用的主要包括：Tris、BICINE、CAPS、MOPS、TAPS、EPPS、MOPSO、HEPES、PIPES等, 每种缓冲剂的作用与原理都有所不同 , 今天要给大家介绍的就是生物缓冲剂中的“扛把子”----- Tris Buffer !

Tris Buffer , 中文品名为三羟甲基氨基甲烷；氨丁三醇；2-氨基-2-（羟甲基）-1,3-丙二醇。是一种白色结晶或粉末，溶于乙醇和水，微溶于乙酸乙酯、苯，不溶于乙醚、四氯化碳. 因由Tris 在水中溶解度高，调节范围广（有效缓冲范围在pH7.0到9.2之间），具有很高的缓冲能力，并且对很多酶反应是惰性的，使它成为用途最广，满意度最高的缓冲液，堪称生物缓冲剂中的“扛把子”!

根据用途和调节范围，经常将Tris配制成以下三种溶液：TBS 、 TBST 和 TAE.

1. TBS--- 即Tris缓冲盐水，是Tris-HCl缓冲盐溶液，为等渗盐溶液加Tris-HCl缓冲液。因为Tris碱的碱性较强，所以可以只用这一种缓冲体系配制pH范围由酸性到碱性的大范围pH值的缓冲液；对生物化学过程干扰很小，不与钙、镁离子及重金属离子发生沉淀。但是缓冲液的pH值受溶液浓度影响较大，温度效应也大，而且易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封，此缓冲液对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。

2. TBST缓冲液--- TBST中含有Tris-HCl，NaCl，tween20这三种物质，是做Western Blotting中常用的一种洗膜缓冲液。目的是洗掉非特异性吸附的蛋白质，并且维持一个接近的天然环境。其中，Tween是一种离子表面活性剂，可加速抗体非特异性结合的分离。因为Western Blotting中所用的膜可以与蛋白质结合，孵育过程中，抗体能够与膜非特异性结合。为了防止以后曝光造成胶片背景太高，在孵育抗体后，混有Tween 20的TBS 能够将非特异性结合的抗体洗掉，增加特异性。TE缓冲液 Tris盐酸缓冲液中加入EDTA制成“TE缓冲液”，TE缓冲液是弱碱性，对DNA的碱基有保护性，因此，DNA在TE中的稳定性较好，不易被破坏完整性或产生开环及断裂，TE缓冲液被用于DNA的稳定和储存。

3.TAE缓冲液--- 将调节pH值的酸溶液换成乙酸，则获得TAE缓冲液(Tris/Acetate/EDTA)，

TAE是使用最广泛的缓冲系统，其特点是超螺旋在其中电泳时更符合实际相对分子质量，且双链线状DNA在其中的迁移率也较快，电泳大于13kb的片段时用TAE缓冲液将取得更好的分离效果。此外，回收DNA片段时也宜用TAE缓冲系统进行电泳。但是，TAE的缺点是缓冲容量小，除非有循环装置使两极的缓冲液得到交换，否则长时间电泳是不可选用的。TBE缓冲液 丙烯酰胺实验以及琼脂糖凝胶电泳将调节pH值的酸溶液换成硼酸则获得“TBE缓冲液”（Tris/Borate/EDTA）。TBE Buffer是分子实验中常用的缓冲液，由Tris和硼酸、EDTA组成，所以简称为TBE buffer。该缓冲液常用于聚电泳实验中。TBE Buffer为无色澄

清液体，可在室温中储存，25℃时的pH值为8.2~8.4。在使用时要注意的是TBE Buffer中不能含有DNA水解酶和RNA水解酶的活性。

Tris 还有很多很奇妙的用途， 欲知详情， 欢迎致电 186 7277 1780（微信同号） 咨询！